PCR实验室 医学实验室建设

PCR聚合酶链反应，是一项在短时间内体外大量扩增特定的DNA片段的分子生物学技术 ,  它可看作是生物体外的特殊DNA复制。进行聚合酶链反应的实验室场所，为PCR扩增实验室。

PCR实验室或称为PCR扩增实验室，就是进行聚合酶链反应的实验室场所 ,  广泛应用于生物学各个领域 。例如艾滋病、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的检测和诊断、DNA指纹、个体识别、亲子鉴定及法医物证、动植物检疫、动物及其衍生产品检测、动物饲料、化妆品、食品检测、转基因作物与转基因微生物检测等。

PCR实验室主要由四间相邻的实验室组成，包括试剂准备区 、标本制备区、基因扩增区和产物分析区。其四区的工作内容如下：

PART.1

试剂准备区

该区域主要完成试剂和主反应混合液的储存、配制和封装工作。所有运送到该区域的试剂和材料不应经过其他区域 ,  试剂和原材料应在本区内储存和制备。本区域的气压应相对外界保持正压。

由于该区域有多种试剂，所以 “安全” 应是平面设计首要考虑因素。平面设计时应保持通风流畅、逃生畅通。首先实验台布置在房间的两侧，中间的过道全部通向走廊，便于疏散。同时根据国际人体工程学的标准，实验台与实验台通道设计为1500mm，中间的通道可满足两边坐人中间过人的要求 。

PART.2

标本制备区

该区域的功能是样本的保存、核酸提取和贮存 、样本加入扩增反应管和测定DNA 的合成。样本应直接运送至该区并储存在本区内，不得经过其他区域。

对于气流压力的控制。由于在本区内加样操作可能产生气溶胶，为避免气溶胶扩散出去对外界造成污染 ,  本区应对外界保持负压。从质量控制的角度而言，本区相对于扩增反应混合物配制和基因扩增区以及扩增产物分析区为正压，以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染 。

但当涉及病原微生物时，从生物安全的角度看，样本制备区应符合GB19489-2008《实验室生物安全通用安全》对BSL-2实验室的各项安全要求 ,  此时要求本区相对于扩增区为负压 ,  故涉及病原微生物操作时，在综合考虑质量控制 、生物安全因素的前提下，整体上标本制备区与扩增区的压力应持平， 即均为负压 ,  两个相邻房间之间的负压值基本相当 。

PART.3

基因扩增区

该区域的功能是DNA扩增和扩增片段的测定。此外 ,  反应混合液  (来自试剂贮存和制备区)  制备成反应混合液和已制备的DNA模板  (来自标本制备区)  的加入等也可在本区内进行。对于气流压力的控制 ,  相对于邻近区域为负压，以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染，应尽量减少在本区内不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。

PART.4

 产物分析区

该区域的功能是扩增产物的分析。该区域可能会用到某些可致使基因突变的有毒物质，应特别注意实验人员的安全防护。对于气流压力的控制 ,  该区域是PCR实验的最后一步 ,  压力应为最低 ,  相对于邻近区域为负压，以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染，应尽量减少在本区内不必要的走动。

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